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人RNA結合基元蛋白8A(RBM8A)ELISA試劑盒實驗使用說明書
以下是關于?人RNA結合基元蛋白8A(RBM8A)ELISA試劑盒?的實驗使用說明,綜合整理自相關技術文檔和產品手冊:
BS-1656 人RNA結合基元蛋白8A(RBM8A)Elisa試劑盒
實驗原理?
采用雙抗體夾心法(ELISA)定量檢測樣本中的RBM8A蛋白?:
包被抗體?:微孔板預包被抗RBM8A捕獲抗體。
抗原結合?:加入樣本/標準品后,目標蛋白與捕獲抗體結合。
檢測抗體?:加入HRP標記的檢測抗體形成復合物。
顯色反應?:TMB底物在HRP催化下顯色(藍→黃),顏色深度與RBM8A濃度正相關?。
樣本處理與保存?
樣本類型?:血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿?。
處理要求?:
血清/血漿:離心去除顆粒(1000×g,10-30分鐘)?。
組織勻漿:生理鹽水搗碎后離心取上清?。
保存條件?:分裝后-70℃保存,避免反復凍融或溶血?。
試劑盒組成?
包被微孔板、標準品(濃度梯度:78-5000 pg/mL或類似范圍)?。
HRP標記檢測抗體、TMB顯色液、終止液、洗滌緩沖液等?。
需自備器材?:酶標儀(450nm)、移液器、恒溫箱、蒸餾水?。
操作步驟?
標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如5000→78 pg/mL)?。
加樣與孵育?:
每孔加入50μL樣本/標準品,37℃孵育1小時?。
洗滌?:清洗未結合物質(建議自動洗板機浸泡30秒)?。
顯色與終止?:
加入TMB顯色液(避光),37℃反應15分鐘。
加入終止液后立即測定OD值(450nm)?。
注意事項?
質量控制?:
批內/批間精密度CV應<12%?。
標準曲線需呈線性(R2≥0.99)?。
干擾因素?:避免溶血、脂血樣本及細菌污染?。
適用范圍?:僅供科研使用,不可用于臨床診斷?。
結果計算?
以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,擬合方程計算樣本濃度?。
若樣本OD值超出標準曲線范圍,需適當稀釋后重測?。
注:以上資料僅供參考,如需進一步技術支持或代測服務,可聯系相關供應商?。
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